DNA penjanaan koloni (Penguatan jambatan)

Primer hadapan dan belakang dilampirkan secara kovalen pada ketumpatan tinggi ke slaid dalam sel aliran. Nisbah primer ke templat pada sokongan menentukan kepadatan permukaan kluster yang diperkuat. Sel aliran terdedah kepada reagen untuk peluasan berasaskan polimerase, dan penyebaran berlaku sebagai hujung bebas / distal dari serpihan ligasi "jambatan" ke oligo pelengkap di permukaan. Denaturasi dan peluasan berulang menghasilkan penguatan setempat DNA serpihan di berjuta-juta lokasi berasingan di seluruh permukaan sel aliran. Penguatan fasa pepejal menghasilkan 100-200 juta kelompok templat yang dipisahkan secara spasial, memberikan hujung bebas yang primer penjujukan sejagat kemudiannya dihibridisasi untuk memulakan reaksi penjujukan. Teknologi ini diajukan untuk mendapatkan hak paten pada tahun 1997 dari Institut Penyelidikan Bioperubatan Geneva Glaxo-Welcome (GBRI), oleh Pascal Mayer, Eric Kawashima, dan Laurent Farinelli, dan disampaikan secara terbuka untuk pertama kalinya pada tahun 1998. Pada tahun 1994 Adams dan Kron mengajukan paten pada operasi penguat permukaan yang serupa, tetapi tidak klonal, yang dinamakan "penguatan jambatan" yang disesuaikan untuk penguatan klonal pada tahun 1997 oleh Church dan Mitra.

Gambar 155A | Teknologi PacBio SMRT dan Oxford Nanopore dapat menggunakan tidak berubah DNA untuk menghadapi metilasi. | Nivretta Thatra / CC BY-SA (https://creativecommons.org/licenses/by-sa/4.0/legalcode) | Page URL : (https://commons.wikimedia.org/wiki/File:3rd_gen_Epigenetics.png) dari Wikimedia Commons

Gambar 155A | Teknologi PacBio SMRT dan Oxford Nanopore dapat menggunakan tidak berubah DNA untuk menghadapi metilasi. | Nivretta Thatra / CC BY-SA (https://creativecommons.org/licenses/by-sa/4.0/legalcode) | Page URL : (https://commons.wikimedia.org/wiki/File:3rd_gen_Epigenetics.png) dari Wikimedia Commons

Pengarang : Yavor Mendel

Rujukan:

Teknik Biologi Molekul I

Alat Biologi Molekul III

Ulasan